孟正平

( 内蒙古自治区乌兰察布市植保站, 内蒙古乌兰察布012000)

中图分类号: S431; S433.4 文献标识码: B 文章编号: 1672- 6820( 2007) 12- 0028- 02

    草地螟成虫具有远距离迁飞习性。一个地区不同世代的蛾峰( 次) 常有迁入、迁出和当地繁育的区别。由于虫源性质不同, 其发生趋势存在显著差异。因此, 在预测发生趋势和防治适期时, 必须先确定不同世代蛾峰( 次) 的虫源性质。而雌蛾卵巢发育进度是判别虫源性质的重要依据之一。因此, 掌握卵巢解剖技术是必要的。笔者根据多年从事草地螟测报工作经验, 总结出解剖草地螟雌蛾卵巢的技术方法, 希望对基层测报人员掌握此方法有所帮助。

1 主要工具与材料

1.1 蜡盘固定虫体的容器。取直径10～12 cm、高2 cm 的培养皿, 装入适量石蜡和少许沥青( 以熔化后占2/3 容积为度) , 放在电炉上间歇加热, 待石蜡等完全熔化后, 将培养皿移离电炉, 自然冷却凝固后即可使用。蜡盘使用多次后, 表面布满针孔, 可用同样的方法复原。也可用钢锯截取内壁高2 cm 的铁皮油漆桶制作蜡盘, 具有不破碎、不爆裂的优点。

1.2 解剖针挑、切、推、割虫体和器官组织用。解剖针可自制。取1 次性注射器4～5 号针头1 个, 铅笔1 截( 长度10～15 cm) , 将铅笔的一端削成圆柱状并嵌入针头, 另一端削出笔芯供随手书写。如铅笔杆与针头嵌合处松动, 可取下笔杆浸入清水中浸泡片刻, 然后重新装上针头即可解决。具体操作时, 可用针尖挑、针体推、针刃切割。如针刃变钝, 可用0号油石磨锋利。

1.3 镊子夹取虫体和器官组织用。一般使用眼科小镊子。

1.4 昆虫针针插、固定虫体用。一般选用1 号昆虫针( 0.32 mm×44 mm) , 也可用大头针代替。

1.5 吸管用于吸取剥离的脂肪体细胞或其他组织碎片。

1.6 解剖镜用于观察雌蛾卵巢发育状态及受精( 交尾) 与否。一般选用连续变倍式双筒体视解剖镜。

1.7 盐水用于浸润虫体、游离脂肪体和其他组织碎片。一般用5%盐水, 可自行配制。

1.8 雌蛾用捕虫网捕获或黑光灯诱到的新鲜雌蛾供解剖。如因故不能及时解剖, 应将蛾子装入塑料袋内, 密封置于冰箱冷藏室, 可暂存2～3 h。否则, 因蛾子脱水干硬或内脏腐败而无法解剖。

2 解剖、观察方法与步骤

2.1 固定蛾子左手持镊子夹住虫体, 使其背部朝上( 腹部朝上亦可) ; 右手持昆虫针插入胸部, 将蛾子固定在蜡盘中央, 再用另1 昆虫针将蛾翅收拢后分别固定( 也可将翅剪掉) 。

2.2 将蛾子放在解剖镜下把固定有蛾子的蜡盘移在解剖镜工作台上, 转动调焦手轮调节焦距, 以虫体物像清晰为度。

2.3 拉虫生殖器左手持镊子夹住虫体腹部末端缓缓向后轻拉, 充分显露腹部节间膜; 右手持解剖针用斜刃向上挑开末节与次节之间的背侧节间膜, 左手持镊子继续向后轻拉, 直至生殖器官充分暴露, 但不可扯断卵巢管端丝悬带。

2.4 剥离、显现卵巢左手持镊子保持静止, 使卵巢呈绷紧状态, 右手持解剖针用针体轻轻向前推动附在卵巢上的脂肪体, 将其剥离松散。然后右手改持镊子, 将游离的脂肪体夹出, 或用吸管将其吸去。

2.5 观察卵巢从低倍率开始, 缓缓转动解剖镜上的变倍调节圈, 直至能够清晰地观察到雌蛾卵巢小管、卵室、卵粒等。一般放大10～40 倍即可。

3 雌蛾卵巢发育进度鉴别

3.1 观察、鉴别内容草地螟卵巢生殖系统包括一对卵巢( 每侧卵巢由4 条卵巢小管组成) , 每侧卵巢的卵巢小管与侧输卵管相连并汇合于总输卵管, 其后部与生殖腔连接。交配囊及附囊、附腺囊及附腺、受精囊及受精囊腺依次通过各自的导管与总输卵管—生殖腔相连接。鉴别卵巢发育进度， 主要观察卵巢小管内的卵室、卵粒发育状态, 交配囊内是否存有精包, 脂肪体消耗情况等进行综合分析判定。

3.2 卵巢发育分级标准根据农业部农技推广服务中心2006 年编制的农业行业标准《农区草地螟预测预报技术规范》, 卵巢发育分级标准为:1 级: 腹内有大量脂肪体, 卵巢管呈透明状或卵

黄沉积在1/3 以下。2 级: 腹内有较多脂肪体, 卵巢管卵黄沉积1/3以上或卵黄沉积已完成。3 级: 腹内脂肪体明显减少, 卵巢管内有大量成熟待产的卵粒或部分卵已产出。4 级: 腹内脂肪体很少, 卵巢管已萎缩或仅有少量遗卵。

3.3 各级卵巢的细部特征以上卵巢发育分级标准是对各级卵巢发育状态的概括。在实际工作中, 需要认识各级卵巢发育级别的细部特征, 才能确保分级准确无误。

1) 1 级卵巢发育特征。初期卵巢小管短细, 全透明, 肉眼看不到内容物。中期在卵巢小管内隐约可见半透明的结节状卵室轮廓。后期在卵室中部出现横向、线状的不透明卵黄沉积物, 卵室两端半透明,卵黄沉积物占卵室空间1/3 以下。形如葡萄串状的脂肪体叶充满腹腔, 脂肪体细胞圆球形、饱满、乳白色。交配囊半透明, 近似纺锤形, 质软, 空瘪, 内有1个淡褐色菱形骨片; 附囊透明, 有1 个小管与交配囊相连。已交配雌蛾绝无上述特征。

2) 2 级卵巢发育特征。卵巢小管较长、较粗。初期, 卵黄沉积物占卵室空间1/3 以上。后期, 卵室全部为卵黄所沉积, 但绝无乳白色的卵壳覆盖。各卵室界限清晰, 在卵管柄可看到深黄色卵管塞。腹腔内脂肪体较满, 脂肪细胞长圆形, 乳白色。交配囊和附囊状况同1 级, 大部分雌蛾未交配。

3) 3 级卵巢发育特征。卵巢小管显著变粗变长。初期, 小管中、下部出现乳白色椭圆形的成熟卵( 卵黄完全被乳白色不透明的卵壳所覆盖) , 但卵管柄仍存有卵管塞。中期, 成熟卵充满小管, 卵粒排列紧密, 卵粒界限不清晰。后期( 产卵盛期) , 卵管塞消失, 侧输卵管和总输卵管存有卵粒, 卵巢小管内卵粒排列疏松, 存在卵粒不相连接的空区。腹腔内脂肪体很少, 脂肪体细胞长形, 部分呈丝状。大部分雌蛾已交配, 交配囊显著膨大, 呈球体, 状如小米粒, 乳白至淡紫色, 质硬有弹性, 内含精包。菱形骨片内陷。交配囊、附囊充盈, 外观呈黄色的小球, 内含黄色液体。

4) 4 级卵巢发育特征。卵巢萎缩, 卵巢小管短而皱缩, 小管下部有少量遗卵( 2～5 粒) , 卵管柄内重现黄色卵管塞。腹内脂肪体耗尽, 残存的丝状气管网缠绕在萎缩的卵巢周围, 形如麻团状。交配囊呈半球状, 淡紫色, 可透见精包残体, 菱形骨片及周围囊体内陷成凹形。交配囊附囊空瘪。

4 注意事项

4.1 网捕与灯诱雌蛾的卵巢发育级别可能有差异田间步测蛾量少的情况下, 网捕成虫比较困难, 应以解剖黑光灯诱雌蛾为主。网捕雌蛾与灯诱雌蛾的卵巢解剖情况存在差异。一般网捕的雌蛾高级别卵巢所占比例较大, 其原因是高级别雌蛾飞翔能力较差, 容易网捕。因此, 网捕和灯诱雌蛾的卵巢发育进度应相互参照。

4.2 应随机取雌蛾解剖在解剖雌蛾时, 操作者往往不自觉地选择腹部较大( 卵巢发育级别高) 的蛾子, 这样容易产生误差。正确做法是随机夹取背面朝上的蛾子, 因其腹部被翅遮盖, 可减少人为误差。

4.3 蛾峰期须改变虫情测报灯的杀虫方式佳多牌虫情测报灯因其采用红外线杀虫技术, 所诱草地螟蛾子虫体干燥, 腹内脏器凝固, 不便做雌蛾卵巢解剖。可卸掉该灯具的红外线杀虫档连线, 改用熏蒸剂农药杀虫( 如80%敌敌畏EC 等) 。